کد آزمایش
457

مورد استفاده
رديابي هموگلوبين داسي شكل (Sickling) ارزيابي كم خوني هموليتيك ارزيابي كم خوني ارثي تشخيص داده نشده با اختلالات مورفولوژيك شبه داسي در گسترش خون محيطي
نام روش اندازه گیری
وش ارجح: الكتروفورز Hb سایر روش ها : آزمایش سیلکلینگ (متابی سولفیت سدیم)، آزمایش انحلال پذیری(دی تیو
نام های مشابه
غربالگری سلول داسی، تست دی‏تیونایت (Dithionite)؛ تست حلالیت ایتانو (Itano)؛ تست متابی¬سولفیت؛ تست حل

نوع نمونه
خون كامل حاوی ضد انعقاد (EDTA، هپارین، ACD)
حجم نمونه
ml 2
نگهداری نمونه
نمونه را پس از نمونه گیری در یخچال نگاه دارید. پایداری نمونه در دمای یخچال 7 روز می باشد
نیازهای همراه نمونه
سن و جنس بیمار و سابقه بیماری آن را یادداشت کنید.
راهنمای جمع آوری نمونه
1. 2 میلی لیتر خون وریدی در ویالهای با درب بنفش جمع آوری گردد. 2. پس از نمونه گیری، موضع را از نظر خونریزی بررسی نمایید. 3. ویال نمونه خون را به آرامی سرو ته کرده تا به خوبی با ماده ضدانعقاد مخلوط گردد. 4. از سانتریفیوژ نمودن نمونه اجتناب نمایید. 5. دانستن سن بیمار و سابقه تزریق اخیر خون حائز اهمیت می باشد. 6. فرمی از تاریخچه بالینی هماپاتولوژی و انکواوژی مولکولی بیماران را درخواست نموده و مستند نمایید.
اطلاعات لازم از بیمار
نام و نام خانوادگی سن و جنس بیمار
معیار رد نمونه
ü نمونه لخته شده ü هموليز شدید نمونه ü نمونه های بدون برچسب یا با برچسب اشتباه ü استفاده از ویال های نامناسب و همچنین عدم تناسب خون با ماده ضد انعقاد.
آمادگی لازم قبل از نمونه گیری
نیاز به ناشتایی یا آمادگی بخصوصی ندارد.

اطلاعات بالینی
HbS ناشی از جابه‏جایی یک اسیدآمینه منفرد (والین به جای گلوتامیک اسید) در موقعیت ششم زنجیرة بتا – گلوبین مولکول هموگلوبین است. حالت هموزیگوت منجر به بیماری سیکل سل می‏شود که با موربیدیتی و مورتالیتی قابل توجهی همراه است .حالت هتروزیگوت موجب سیکل تریت (صفت داسی شدن) می‏شود که به طور معمول موربیدیتی ناچیزی داشته یا بدون موربیدیتی است. بیماری داسی طیفی از شدت بالینی را نشان می‏دهد که بخشی از آن مرتبط با فعال شدن انعقاد از طریق از دست رفتن عدم تقارن طبیعی فسفولیپید غشاء و نمایان شدن فسفاتیدیل بر سطح سلول است. فسفاتیدیل سرین سطحی، یک جایگاه لنگراندازی (docking site) برای پروتئین‏های هموستاتیک بوده که منجر به افزایش فعالیت پیش انعقادی (پروکواگولانت) می‏شود. فقر آهن غلظت متوسط کورپوسکولار داکسی هموگلوبین S را پایین آورده و منجر به کاهش تمایل به داسی شدن و شدت همولیز می‏شود. در بیماران مبتلا به سیکل¬سل‏ تریت احتمال ایسکمی سگمان قدامی چشم در جراحی دکولمان شبکیه وجود دارد. تمایز بین بتاتالاسمی HbS– و آنمی سلول داسی همیشه براساس بالینی، هماتولوژی یا الکتروفورز امکان¬پذیر نمی‏باشد. افتراق می‏ت
تفسیر
تست‏های غربالگری برای ردیابی کم خونی سلول داسی و موارد مرتبط با آن که شامل هموگلوبین S (مثل SC، SD، سیکل تالاسمی و غیره) می‏باشند به کار برده می‏شود. تست حلالیت داسی براساس کاهش حلالیت هموگلوبین S در یک بافر فسفات غلیظ همراه با ردیابی استاندارد شدة توربیدیتی حاصله می‏باشد. اگر تست غربالگری داسی مثبت باشد، آنگاه باید مطالعات تأییدی (مثل الکتروفورز هموگلوبین) انجام شوند. در گستره خون محیطی مبتلایان به بیماری داسی، گلبول های قرمز داسی شکل مشاهده نمی شود، مگر آنکه هیپوکسی وجود داشته باشد. در آزمون سلول داسی ماده ای داکسیژنه کننده ( مانند متابی سولفیت سدیم2%) به خون بیمار می افزایند. چنانچه حداقل 25% هموگلوبین از نوع S باشد، سلولها هلالی یا داسی می شوند و آزمایش مثبت می گردد. اگر داسی نشوند آزمون منفی می گردد. در آزمایش حلالیت (مانند سیکل دکس) دیتیونات به خون بیمار افزوده می شود. بدین ترتیب HbS رسوب می کند. آزمون منفی نشانگر آن است که بیمار فاقد HbS بوده و یا سطح آن بسیار پایین است. این آزمایشها توانایی افتراق میان بیماری سلول داسی از صفت آن را ندارند. در بیماری سلول داسی 100%-80 % هموگلو
احتیاط ها
• استفاده از متابی‏سولفیت یا معرف‏های تست حلالیت داسی که تاریخ مصرف آنها گذشته ممکن است سبب نتایج منفی کاذب شود. • انتقال خون در طی 4-3 ماه قبل از انجام آزمون، سلول داسی می تواند سبب نتایج منفی کاذب شود. زیرا هموگلوبین اهداکننده موجب رقیق شدن HbS غیر طبیعی در گیرنده خون می شود. • غلظت کم HbS در سلولها (بعد ار انتقال خون یا نوزادان)، نسبت پایین HbS در هر سلول (آلفا تالاسمی و فقر آهن)، آنمی (هموگلوبین کمتر از 8)، غلظت بالای هموگلوبین F (هموگلوبین جنینی) باعث کاهش مقدار HbS در شرایط داخل بدن (invivo) خواهد شد. • تخریب حاصل از عوامل احیاء کننده در شرایط آزمایشگاهی (invitro) باعث کاهش مقادیر HbS می گردد. • نتیجه آزمون در نوزادان کمتر از سه ماه ممکن است منفی کاذب شود، زیرا حتی در نوزادان مبتلا به سلول داسی مقدار زیادی HbF در گلبول های قرمز، در این سن وجود دارد. HbF داسی نمی شود. پس از سن 6 ماهگی HbS افزایش می یابد و تنها در آن هنگام است که آزمون مثبت خواهد شد. • داروهای فنوتیازینی موجب نتایج منفی کاذب می شوند.